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ELISA試劑盒技術(shù)是利用酶催化底物反應(yīng)的生物放大作用,提高特異性抗原-抗體免疫學(xué)反應(yīng)檢測敏感性的一種標記免疫技術(shù)。該技術(shù)所用的酶要求純度高、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高、專一性強、性質(zhì)穩(wěn)定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定,繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力。在受檢標本中不存在與標記酶相同的酶。另外它的相應(yīng)底物應(yīng)易于制備和保存,價格低廉,有色產(chǎn)物易于測定,光吸收高。
ELISA試劑盒建議使用的實驗方案
| 標準品濃度(U/ml) |
| ||||||||||
A | 80 | 80 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
B | 40 | 40 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
C | 20 | 20 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
D | 10 | 10 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
E | 5.0 | 5.0 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
F | 2.5 | 2.5 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
G | 0 | 0 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
H | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
ELISA試劑盒實驗設(shè)計中的“六原則”
一、隨機原則:
即運用“隨機數(shù)字表”實現(xiàn)隨機化;運用“隨機排列表”實現(xiàn)隨機化;運用計算機產(chǎn)生“偽隨機數(shù)”實現(xiàn)隨機化。 盡量運用統(tǒng)計學(xué)知識來設(shè)計自己的實驗,減少外在因素和人為因素的干擾。
二、照原則:
空白對照組的設(shè)立——只有通過對照的設(shè)立我們才能清楚地看出實驗因素在當中所起的作用。當某些處理本身夾雜著重要的非處理因素時,還需設(shè)立僅含該非處理因素的實驗組為實驗對照組;歷史或中外對照組的設(shè)立一一這種對照形式應(yīng)慎用, 其對比的結(jié)果僅供參考,不能作為推理的依據(jù);多種對照形式同時并存。
三、重復(fù)原則:
所謂重復(fù)原則,就是在相同實驗條件下必須做多次獨立重復(fù)實驗。一般認為重復(fù)5次以上的實驗才具有較高的可信度。
四、平衡原則:
一個實驗設(shè)計方案的均衡性好壞,關(guān)系到實驗研究的成敗。應(yīng)充分發(fā)揮具有各種知識結(jié)構(gòu)和背景的人的作用, 群策群力,方可有效地提高實驗設(shè)計方案的均衡性。在實驗設(shè)計的過程中要注意時間上的分配,只有在時間上分配好了,才不會出現(xiàn)一段時間特別忙而一段時間特別閑的情況。
五、彈性原則:
所謂空格,指的是在時間分配圖上留有空缺。適當?shù)目杖笔欠浅1匾?,只有這樣才能富有彈性的實施實驗計劃,并不斷地調(diào)整好自己的實驗進度。
六、原則:
不論什么實驗,都有它的*選擇方案,這包括在資金的使用上,也包括人力時間的損耗上,必要時可以預(yù)測一下自己實驗的產(chǎn)出和投入的比值,這個比值越大越好,當然是以你所擁有的實驗條件作基礎(chǔ)的。
注:本文實驗設(shè)計須遵守的六原則屬于實驗設(shè)計文章,主要介紹實驗設(shè)計方面的知識,內(nèi)容僅供學(xué)習交流與參考。