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人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒
研域(上海)化學試劑有限公司國產(chǎn)elisa試劑盒做的確實不錯的,該公司導師一般都認可的,其實和進口的沒什么區(qū)別的,而且操作比較簡單.
研域(上海)化學試劑有限公司自研究所改制以來在分子生物學試劑盒、熒光定量PCR、siRNA載體構(gòu)建、全基因合成拼接、熒光探針修飾、多肽合成、dNTP、Pfu酶、熱啟動Taq酶、DNA marker、基因工程、原生質(zhì)體的培養(yǎng)、細胞融合、單克隆抗體診斷試劑等研究方向作了深入的研究。
它是一家技術(shù)服務型渠道企業(yè),在行業(yè)發(fā)展中所承擔的角色是一種溝通產(chǎn)出方和需求方(科研和市場)的媒介,我們致力為行業(yè)人才提供了包括科研在內(nèi)的更多出口,為科研提供了有力的硬件支持,有效地促進科研和市場需求結(jié)合,提高了科研成果的轉(zhuǎn)化效率,使得科研更具活力。目前國家對于生物行業(yè)的發(fā)展給予了很大的重視,但更多地側(cè)重于科研的投入,行業(yè)內(nèi)缺乏*的技術(shù)服務體系和渠道支撐... 研域(上海)化學試劑有限公司
本試劑盒僅供研究使用。
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒
檢測范圍:3 U/L -160 U/L
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平。用純化的人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入NAG,再與HRP標記的NAG抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的NAG呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)濃度。
試劑盒組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品(320 U/L) 0.5ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
160U/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
80 U/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
40 U/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
20 U/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
10 U/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn))。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
操作程序總結(jié):
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
RLS003452-100mg Ribonucleic acid from Baker’s Yeast 核糖核酸 [63231-63-0] 100mg
RLS003453-1g Ribonucleic acid from Baker’s Yeast 核糖核酸 [63231-63-0] 1g
RD0475-25g D-Ribose D-核糖 [50-69-1] 25g
RB0809-50g Rose bengal, sodium salt 虎紅鈉鹽 [632-69-9] 50g
RB0811-25g Roxithromycin 羅紅霉素 [80214-83-1] 25g
R6731-1g Ruthenium Red 釕紅 [11103-72-3] 1g
RD0475-100g D-Ribose D-核糖 [50-69-1] 100g
R0671-5g D-Ribose D-核糖 [50-69-1] 5g
S0227-100g SDS 十二烷基硫酸鈉 [151-21-3] 100g
S0227-500g SDS 十二烷基硫酸鈉 [151-21-3] 500g
S6735-25g Sesamol 芝麻酚 [533-31-3] 25g
R0671-25g D-Ribose D-核糖 [50-69-1] 25g